脂肪酸甲酯中游离甘油含量的测定就用气相色谱法

脂肪酸甲酯中游离甘油含量的测定是根据国标GB/T28769-2012进行的，根据以下标准，可以选择上海密通SYP-28769脂肪酸甲酯中游离甘油含量试验器进行测定。

警告:本标准的应用可能涉及某些有危险性的材料、操作和设备,但并未对与此有关的所有安全问题都提出建议。用户在使用本标准前有责任制定相应的安全和防护措施,并确定相关规章限制的适用性。

1范围

1.1本标准规定了采用气相色谱法测定脂肪酸甲酯(FAME)中质量分数范围为0.005%~0.07%的游离甘油含量的方法。

1.2本标准适用于评价纯态生物柴油的脂肪酸甲酯的质量。甘油作为酯交换反应的副产物,其浓度会影响燃料的性能。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是bi不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修gai单)适用于本文件。

GB/T 4756石 油液体手工取样法(GB/T 4756- -1998 ,eqv ISO 3170:1988)

GB/T 15687动植物油脂试样 的制备(GB/T 15687- -2008 ,ISO 661 :2003 ,IDT) .

3术语和定义 ，

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

游离甘油含量free glycerol content

动植物油脂经酯交换反应并将甘油相分离后残存于脂肪酸甲酯中的少量甘油。

4方法概要

将乙醇、水和正已烷及一定量的内标物加入到已知量的试样中,使混合物形成两相。游离甘油定量转移至下层溶液中。采用气相色谱法测定下层溶液以定量确定游离甘油的含量。

5试剂和材料

如非特别说明,所有试剂均为分析纯。

5.1 正己烷。

5.2 1,4丁二醇 :纯度不低于99%。

5.3 乙醇 :纯度不低于95%。

5.4 甲酸:纯度不低于 99%。

5.5甘 油:纯度不低于99%。

5.6载气:氦气或氢气,符合气相色谱载气要求,一 般纯度不低于99. 99 %。

5.7辅 助气体:

----氢气:纯度不低于99.99%,不含水和有机化合物;

----空气:干燥空气,不含有机化合物。

5.8 内标物溶液:在100 mL容量瓶中准确称量约80 mg(精确至0.1 mg)1,4-丁二醇,用少量蒸馏水溶解,加入1mL甲酸,用蒸馏水稀释至刻度。按此步骤制备的溶液在室温下可以稳定存放24h。

6仪器

6.1 具备有下列配置的气相色谱仪。

6.1.1色谱柱箱 :设定温度的控制精度为士1 C。

6.1.2进样口 :分流/无分流进样口或填充柱进样口。

6.1.3火焰离子化检测器(FID)及信号转换/放大系统。

6.1.4 记录仪/积分仪:能够与信号转换/放大系统连接使用，最大响应时间小于1 s,绘图速度可以调节。

6.1.5毛细管 色谱柱:类型为PoraPLOT Q,长度10 m,内径0.32 mm,液膜厚度10 靘(见注),或采用固定相为CHROMOSORB 101,内径4 mm,长度1 m的填充柱。采用的色谱柱应满足甘油和内标物的色谱峰*分离(两色谱峰之间的基线接近零点),分析时间小于15 min,并且按照9.3测定得到的甘油的校正因子不超过2.5。

注:已注意到不同生产商所提供的毛细管色谱柱的性能存在差别,有些在使用中会带来一些问题。有人提出使用游离脂肪酸分析用固定相(FFAP)或聚乙二醇固定相的毛细管色谱柱。无论使用何种类型色谱柱,其分离效果需满足指标要求。

6.1.6流量控制器,用于载气和辅助气流量控制。

6.2气相色 谱用微量注射器:5 ul或10 ul。

6.3 容量瓶:50 mL和100 mL。

6.4 移液管:1 mL。

6.5带刻度移液管 :5 mL。

6.6分析天平:感量0.1 mg。

6.7玻璃锥形离心试管:10mL。

6.8离心机:转速可达到2000r/min。

7取样

7.1按照GB/T4756的方法取样。

7.2取样过程应考虑到脂肪酸甲酯中的游离甘油与玻璃容器有很强的亲和性,因此应避免使用玻璃容器收集和储存样品,可使用合适的塑料容器。

8试样制备

按照GB/T15687的要求准备试样。试样不能加热或过滤。

9操作步骤

9.1 色谱条件

9.1.1毛细管 柱可使用下列条件:

-----不分流模式:

a)色谱柱箱温度 :初温150 C,保持1 min,升温速率40 C/min,终温210 C,保持12 min;

b) 进样口温度:250 °C;

c) 检测器温度:250 C;

d) 进样0.5 min后打开分流阀，分流比约20: 1;

e)载气流量:3 mL/ min。

------分流模式:

a)色谱柱箱温度:210 C;

b) 进样口温度:230 C;

c) 检测器温度:250 C;

d)分流比:约 50: 1;

e) 载气流量:1 mL/ min~2 mL/ min.

9.1.2填充柱可使用下列 条件:

----色谱柱箱温度:200 C;

-----进样口温度:230 °C;

-----检测器温度:250°C;

------载气流量:20 mL/ min~30 mL/ min。

注:推荐采用毛细管柱的不分流进样模式色谱条件,以保证测定的灵敏度。

9.2色谱峰定性

根据相同条件下甘油和内标物的保留时间可以确定试样中甘油和内标物的色谱峰。图1为典型色谱图。

9.3甘油校正因子的测定

准确称量约100 mg(精确至0. 1 mg)甘油和100 mg(精确至0.1 mg)1,4-丁二醇于100 mL容量瓶中,加入50mL乙醇(见5.3)溶解,并用蒸馏水稀释至刻度。配制过程中注意水/醇混合时的放热效应和体积的减少。取1霯此混合溶液注人色谱系统并按照前述色谱条件进行分析,至少平行测定三次，计算甘油的校正因子。该溶液在室温下可以稳定储存几周。根据色谱图结果和式(1)计算甘油的校正

因子Fr:

式中:

A1 ------1,4-丁二醇峰面积;

A2 -----甘油峰面积;

M1-----溶液中1,4-丁二醇的质量, 单位为毫克(mg);

M2------溶液中甘油的质量,单位为毫克(mg)。

按照式(2)计算的甘油校正因子F,应不超过2.5(见6. 1.5中注)。

9.4定量分析

9.4.1 试样准备

称量约3.5 g(精确至0.1 mg)试样(约4 mL)于10 mL离心试管中,加人1 mL乙醇(见5.3),轻轻

振摇使混合均匀。准确加入1 mL内标物溶液(见5.8)和4 mL正已烷,盖紧试管塞并剧烈振荡5 min。离心分离15 min。取下层溶液进行色谱分析。

9.4.2色谱分析

用微量注射器取约1 霯下层溶液,然后抽人一定量的空气使针头中无溶液滞留(“热针"技术),仔细将注射器及针头用纸巾擦拭干净,将注射器针头通过隔垫插人进样口,等待5s,快速将试样注人汽化室,5s后拔出进样针头。在色谱图上标记进样时间,甘油色谱峰流出后继续几分钟。

10 计算和报告

根据积分结果计算试样中的游离甘油的含量。游离甘油的质量分数w(%)按式(2)计算:

式中:

A1、A2、Fr-----与式(1)中含 义相同;

M1----试样中加入的1,4丁二醇的质量,单位为毫克(mg);

M2----试样的质量,单位为毫克(mg)。

结果以质量分数(%)表示,精确至小数点后第2位。

11 精密度

11.1实验室间精密度详细测定数据见附录A。据此得出的精密度值不适用于超出所列试样类型和浓度范围的试样测试。按照下述规定判断试验结果的可靠性(95%置信水平)。

11.2 重复性(r)

同一实验室同-操作人员、采用同一仪器设备,在相同的实验条件下,对同一-试样两次重复测定结果之差不应超过表1中重复性(r)的值。

11.3 再现性(R)

不同实验室、不同操作人员、采用不同仪器,对同一试样两个单一和独立测定结果之差的绝对值,不应超过表1中再现性(R)的值。

表1测定重复性和再现性(r和R)

12 试验报告

试验报告应注明:

----识别试样的必要信息;

----所用采样方法;

----分析方法及标准号;

----本标准未列出的操作细节，以及有可能影响分析结果的其他因素;

----测定结果(见第 10章)。

附录A

(资料性附录)

实验室间试验结果

实验室协作试验涉及欧洲范围5个国家7个实验室对5个试样的分析结果。

试样1:由葵花籽油制备的脂肪酸甲酯。

试样2:由菜籽油制备的脂肪酸甲酯1。

试样3:由菜籽油和葵花籽油混合制备的脂肪酸甲酯(75:25)。

试样4:由菜籽油制备的脂肪酸甲酯2。

试样5:由菜籽油和葵花籽油混合制备的脂肪酸甲酯(25:75)。

本试验项目由欧洲标准化委员会CEN/TC307/WG1工作组于1999年组织进行,获得的试验结果按照ISO 4259的要求进行统计分析,得到的精密度数据见表A.1。